و ازرة التربية إجهارية التأل ق عالية الدقة إعداد الطالب: سليم حنا

Transcript

1 الجمهوري ة العربي ة الس وري ة و ازرة التربية المركز الوطني للمتمي زين إجهارية التأل ق عالية الدقة إعداد الطالب: سليم حنا إش ارف المدر س: لؤي حمرة في الكيمياء بحث حلقة

2 هذه الصفحة تركت فارغة عمدا 1

3 مقد مة: لطالما كان لدى البعض عداء تجاه المعتقدات القديمة في المجتمع والعلم كالمجتمع فيه من النظريات القديمة التي قيدت قد ارتنا على البحث ما جعل البعض يعملون على تجاوز هذه النظريات واخت ارق الحدود القديمة وبذلك حققوا أعظم االكتشافات العلمية واستحقوا ألجلها التكريم. فجائزة نوبل في الكيمياء الصادرة عن األكاديمية الملكية السويدية للعلوم م نحت لعام لكل من إيريك بيتزيك Eric Betzig وستيفان هيل Stefan.W Hell وويليام مورنر 2014 William. E Moerner وذلك لتجاوزهم حدا علميا افت ارضيا يشترط أن المجهر الضوئي ال يمكن أن يعطي أبدا دقة أفضل من 0.2 ميكرو متر. فباستخدام 1 الجزيئات المتألقة)الم ف لو رة( على م ارقبة التأثير المتبادل بين الجزيئات والمجهر الضوئي الم ف لو ر أصبح العلماء اآلن قادرين )كل جزيئة على حدى ) في داخل الخاليا حيث أصبح بإمكانهم م ارقبة إجمالي البروتينات المرتبطة باألم ارض باإلضافة إلى تعق ب انقسام الخلية على المستوى النانوي. تاريخيا كان المجهر الضوئي أداة أساسية في علم األحياء فمنذ درس العلماء عضيات حي ة تحت المجهر الضوئي ألول مرة في القرن السابع عشر ف تح عالم جديد أمام أعينهم وكانت تلك والدة علم األحياء المجهري ومنذ ذلك الحين أصبح المجهر الضوئي أهم أداة في األبحاث الحيوية لكن مشكلته كانت في عدم قدرته على التكبير لألبعاد النانوية مما دفع العلماء للبحث عن أساليب أخرى كالمجهر االلكتروني فحصها تحته. فكرة الذي يصل لألبعاد النانوية ولكن بالمقابل يجب قتل المادة الحية قبل ولذلك برزت مشكلة أساسية وهي د ارسة المادة الحية بأبعاد نانوية دون قتلها فمن هنا ظهرت المجهر المف لو ر عالي الدقة الذي يدرس المادة الحية باألبعاد النانوية دون الحاجة إلى قتلها وهذا اخت ارع يستحق البحث في مبدأه وآلية عمله واستخداماته. 2 1 الجزيئات المتألقة )المفلورة(: هي الجزيئات التي تصدر إشعاعا )تتألق( )وخاصة الضوء المرئي( عند تعريضها إلى إشعاع خارجي كالضوء أو األشعة السينية.

4 قائمة المحتويات الموضوع مقد مة مبادئ ونظريا ت التأل ق والجزيئات المتأل قة رقم الصفحة 2 4 الباب األو ل الفصل األو ل 7 الفصل الثاني الجزيئات فيزيائيا حد ا تتخطى المتأل قة الباب الث اني الدقة عالي المف لو ر المجهر عمل وطرق آليات 9 STED الفصل األو ل اإلصدار تقنية المحثوث المستنفذ 31 الفصل الثاني الوحيد الم ف لو ر الجزيء مطيافية 35 خاتمة 36 قائمة المصادر والم ارجع 38 األشكال فهرس 38 فهرس الجداول 3

5 الباب األول: مبادئ ونظريات الفصل األول: 2 التأل ق والجزيئات المتأ لقة التأل ق Fluorescence )أو االستشعاع( هو إصدار الضوء من قبل مادة كانت قد امتصت قبال ضوءا أو إشعاعا كهرومغناطيسيا آخر ويتوقف هذا اإلصدار فجأة عند توقف الطاقة المحفزة وفي معظم الحاالت يكون الضوء الصادر ذو طول موجة أطول من اإلشعاع الممتص ونتيجة لذلك يكون أخفض منه بالطاقة. 1. فل ازت متأل ق ة تصدر ضوءا مرئيا عند تعريضها لألشعة فوق البنفسجية. ومن األمثلة المميزة لهذه الظاهرة هو التأل ق الناتج عن امتصاص إشعاع من منطقة فوق البنفسجي )أي أنه غير مرئي للعين المجردة( واصدار ضوء من منطقة الضوء المرئي فيبدو الجسم وكأن ه يتأل ق من تلقاء نفسه. 4 للتأل ق ويوجد العديد من التطبيقات العملية في بما وأجهزة الكشف 3 الفلورة ووضع ذلك صناعة الكيميائية المعادن والجواهر )مطيافية التأل ق أو )fluorescence spectroscopy العالمات الفلورية واألصبغة وأجهزة 2. أسماك بحرية يمكنها أن تتأل ق. 2 An article entitled " Fluorescence" 9/1/2015 (5:30 PM) 3 مطيافية التأل ق أو الفلورة: هي نوع من المطيافيات الكهرومغناطيسية التي تحل ل الضوء الصادر عن عينة متأل قة وتستعمله في تحديد هوية هذه العينة.

6 الكشف مصابيح الحيوية والكشف 4 الفلورسنت كما عن يحدث األشعة التأل ق الكونية أيضا واألكثر كثير في شيوعا من األحيان في الطبيعة في بعض المعادن وفي حاالت حيوية عديدة في العديد من فروع المملكة الحيوانية. تم تفسير التأل ق على أنه عودة الكترون في كيميائيا جزيء أو ذرة أو بنية نانوية إلى حالته األرضية )سويته الطاقية الدنيا( وذلك بعد إثارته إلى سوية طاقية أعلى من خالل بعض أنواع الطاقة ويعبر عن ذلك بالمعادالت التالية: 3. مصباح الفلورسنت S 0 + hv ex S 1 (مرحلة اإلثارة) ح اررة + em ) S 1 S 0 + hv مرحلة التأل ق) S: 0 الحالة األرضية )السوية الطاقية الدنيا( للجزيء المتأل ق S: 1 أول سوية طاقية ينتقل إليها االلكترون المثار :hv مصطلح يشير إلى الطاقة الضوئية )طاقة الفوتون( حيث: v: em تواتر الشعاع h: ثابت بالنك v: ex تواتر الشعاع المثير الصادر ويوجد ما يسمى بالمردود الكوانتي )الكمومي( yield) )Quantum وهو مقدار يعطي مدى فعالية عملية التأل ق ويساوي نسبة عدد الفوتونات المصدرة إلى عدد الفوتونات الممتصة كما في العبارة: عدد الفوتونات المصدرة Φ = عدد الفوتونات الممتصة (1) ويشير زمن التأل ق lifetime) (the fluorescence إلى الزمن المتوسط الذي تبقى فيه الكترونات الجزيء في حالتها المثارة قبل أن تصدر فوتونا ويتبع زمن التأل ق قانون سرعة التفاعل من المرتبة األولى: 5 4 مصابيح الفلورسنت والمعروفة أيضا بالمصابيح الموفرة للطاقة.

7 [S 1 ] = [S 1 ] 0 e kt (2) :[S 1 ] 0 t تركيز الجزيئات المثارة عند الزمن S]: 1 ] التركيز االبتدائي للجزيئات المثارة t: الزمن k: ثابت سرعة التفاعل لم كما ذ كر سابقا فيمكن استخدام مطيافية التأل ق لتحديد هوية العينة المتأل قة فعملية التأل ق بأكملها عملية دورية )أي تكر ر نفس م ارحلها كل ما تعر ضت العينة لمصدر طاقة جديد ( وذلك ما تتفاعل الجزيئات المثارة من العينة مع المحيط كالتفاعل مع األوكسجين وتشكيل مواد جديدة ففي الحالة الطبيعية يمكن لنفس العينة أن ت ثار وت تعقب م ار ار وتك ار ار ومن المبادئ األساسية لتقني ات رصد التأل ق عالية الحساسية الفوتونات القابلة للرصد من قبل جهاز المطيافية. أن العينة المتألقة الواحدة يمكن أن تول د عدة آالف من ت ستخدم مطيافية التأل ق في حقول البحوث الكيميائية الحيوية والطبية والكيميائية لتحليل المركبات العضوية كما تستخدم في التفريق بين األو ارم الجلدية الحميدة والخبيثة ويمكن استخدام تقنيات مطيافية التأل ق في الكشف عن وجود مركب ما وتحديد كميته سواء في الهواء أو الماء أو في أوساط أخرى مثل مطيافية التأل ق الذري للبخار البارد (Cold Vapour Atomic 5 CVAFS )Fluorescence التي الكيمياء التحليلية فتستخدم أجهزة الكشف عن التأل ق مع.HPLC (High Performance liquid chromatography) يستخدم في الكشف عن المعادن الثقيلة مثل الزئبق أما في الكروموتوغ ارفيا السائلة عالية األداء 6 5 مطيافية التأل ق الذري للبخار البارد: تقوم على الحصول على بخار المادة دون رفع درجة حرارتها )عن طريق تطبيق ضغط منخفض جدا مثال ( وإثارة جزيئات هذا البخار لتتأل ق ثم تحديد هوية هذه المادة عن طريق رصد األشعة الصادرة عن الجزيئات المتأل قة.

8 الفصل الثاني: 6 الجزيئات المتأ لقة تتخطى ح دا فيزيائيا لوقت طويل كان استخدام المجهر الضوئي مقي دا بحجم البنى التي يمكن رؤيتها بواسطته وفي عام 1873 نشر العالمان إرنست إبه Ernst Abbe واللورد اريلي Lord Rayleigh معادلة توضح كيف أن دقة المجهر محدودة بطول موجة الضوء باإلضافة إلى أمور أخرى سميت هذه المعادلة 7 ب "حدود االنع ارج" لإلجهارية. diffraction limit of microscopy المستوي األفقي هذه المعادلة تفرض أنه من المستحيل أن ي رى عنص ارن من بنية (x,y) وحتى العمودي (z) في المجهر وبكلمات أخرى وفقا لمعيار إبه أن ت رى بوضوح أصغر من نصف طول موجة الشعاع فإن في المستوي األفقي تق در بالعبارة: ما البعد بينهما (λ) في المستخدم δ) Xmin التي يمكن, δ Ymin أصغر المسافات ) (δ Xmin, δ Ymin ) λ 2 (3) ونتيجة أخرى لمعادلة حدود االنع ارج أن ه من غير الممكن تسليط بقع ة على ليز ر شعاع. 4 أبعادها أصغر من 2/λ 4. حدد إرنست إبه في نهاية القرن التاسع عشر حد دقة المجهر الضوئي بنصف طول موجة الضوء المرئي وهي حوالي μm) 0.2 ) أي أن العلماء تمكنوا من تمييز الخاليا بالمجمل باإلضافة إلى بعض عضيات هذه الخاليا ولكنهم لم يتمكنوا أبدا من تمييز أي شيء بصغر الفيروس طبيعي الحجم أو البروتينات األحادية. 7 6 THE NOBEL PRIZE IN CHEMISTRY 2014, THE ROYAL SWEDISH ACADEMY OF SCIENCES, Popular Science Background, اإلجهارية :microscopy هي استخدام المجهر.

9 أكثر دق ة: فعليا العالقة )1( ال تصف بشكل دقيق حدود االنع ارج لذلك فقد تم صياغة عالقة جديدة (δ Xmin, δ Ymin ) = min = λ 2 n sin (α) (4) : min حدود دقة المجهر في تحديد البنية n: قرينة انكسار الوسط المحيط بالمجهر α: نصف ال ازوية بين المسقط العمودي االفت ارضي للشعاع الضوئي الصادر من فتحة المجهر ومسقطه الفعلي على المحضر المدروس (z) ونشتق من العالقة )1( العالقة المعبرة عن الدقة بالنسبة إلى المحور وهي: δ Zmin = min = λ 2 n sin 2 (α) (5) ولكن معادلة "حدود االنع ارج" لم تبقى السائدة فقد تم نقضها على مسارين متوازيين ناال جائزة نوبل بالمناصفة على الرغم من أن كل واحد تم تطويره بشكل مستقل عن اآلخر أو لهما هو المسار الذي عمل فيه ستيفان هيل وثانيهما هو المسار الذي عمل فيه مورنر. ويليام و بيتزيك إيريك 8

10 الباب الثاني: آليات وطرق عمل المجهر الم ف لو ر عالي الدقة 8 الفصل األول: تقنية اإلصدار المحثوث المستنفذ STED المستنفذ مجهرية قام فريق ستيفان هيل في معهد ماكس بالنك سنة 2222 بتطوير تقنية اإلصدار المحثوث STED (stimulated emission depletion) ضوئية متوضعة ضمن منطقة عدا الفلورة عالية عينة الدقة حيث من بأبعاد أجل النانومتر المساعدة عند تستخدم على مركز التقنية هذه رؤيتها ليزر ويستخدم الليزرين ولذلك من أولي ليزر فبمسح أجل يسلط ثان العينة الحصول من على أثناء أجل على جزيئات تخميد تسليط صور م ف لو رة عملية الليزرين عليها تتشكل صورة بدقة عالية للبنى المدروسة )مثل هذه البنى متعضيات الخلية التي في طور التكوين( وبسماكة طالما واحد نانومتر األخرى التي قد تشكل صورة ضبابية. المنعكس عن الضوء إلغاء سيتم أنه الجزيئات الم ف لو رة ولضبط فعالية تقنية اإلصدار المحثوث المستنفذ يجب أن يكون تشتت الضوء في مركز الليزرين )البقعة المركزية( شبه معدوم مما يضع بعض الحدود أمام األجهزة الضوئية التي يمكن استخدامها في هذه التقنية. 9 8 An article entitled super resolution light microscopy wins chemistry Nobel November 6th 2014 (6:00 pm)

11 5. مقارنة بين آلية عمل المجهر الضوئي التقليدي )على اليسار( ومجهر الSTED )على اليمين( ت رسل حزمة ضوئية واحدة تقوم بإثارة كل الجزيئات في البنية حيث نالحظ أنه في المجهر التقليدي المدروسة مما يؤدي إلى تداخل االنعكاسات الضوئية لهذه الجزيئات وبالتالي تظهر الصورة ضبابية بينما مخمدة لتثبيط تألق في مجهر الSTED 3( يتم إرسال حزمة ليزرية مثيرة للجزيئات يحيط بها حزمة ليزرية الجزئيات ما عدا الجزيئات الم ارد فحصها والتي تكون ضمن نطاق الحزمة المثيرة 2( وهكذا تمسح أشعة الليزر العينة فحالما يعرف العلماء أين يصدم الشعاع العينة يصبح بإمكانهم استخدام هذه المعلومات لتشكيل صورة أكثر دقة 1( وتكون الصورة النهائية بدقة أفضل من 2.2 ميكرومتر. ففي البدايات األولى الستخدام هذه التقنية كان عدد األصبغة التي يمكن استخدامها محدودا جدا حيث كان الرودامين-ب اإلصدار لتقنية المحثوث المستنفذ في منطقة اللون األحمر من الطيف. (Rhodamine B) كما أنه لد ارسة األنظمة الحيوية المجهرية بتقنية أول األصبغة المذكورة في الوصف النظري كنتيجة لذلك كانت األصبغة األولى المستخدمة مصدرة لليزر اإلصدار المحثوث المستنفذ يجب أن تكون األصبغة ومصادر الليزر متوافقة ومالئمة لهذه األنظمة األمر الذي أد ى إلى استخدام أصبغة وأنظمة إثارة أكثر تطو ار المحثوث المستنفذ(. )يبي ن 3 أحدث األصبغة المستخدمة في تقنية اإلصدار من أهم التطو ارت التي حدثت لتقنية اإلصدار المحثوث المستنفذ هو تطوير خاليا مناعية (immunolabeled cells) هي عبارة عن أصبغة متأل قة )م ف لو رة( مرتبطة مع األضداد من خالل روابط أميدية وكان أول استعمال لهذه التقنية من خالل ربط صبا غ أحمر يسمى MR-121SE 11

12 مع أضداد ثانوي ة مضادة للفئ ارن ومنذ ذلك الحين است خدم العديد من األصبغة بما فيها المصدرة ATTO 590 للضوء األخضر مثل ATTO 532 واألصفر مثل باإلضافة إلى أصبغة أخرى مصدرة للضوء األحمر كما تم استخدام الصباغ ATTO 647N ألول مرة مع هذه التقنية إلنتاج STED بلونين. أحدث األصبغة المستخدمة في تقنية اإلصدار المحثوث المستنفذ. 3 واحدة من الصور األولى الملتقطة من قبل ستيفان هيل باستخدام مجهر STED إلى اليسار.6 جرثوم E.coli مصو ر باستخدام مجهر تقليدي والى اليمين نفس الجرثوم مصو ر باستخدام مجهر STED نالحظ أن صورة STED أفضل بثالث م ارت من صورة المجهر التقليدي. 11

13 7. مقارنة بين صورة لبروتين ملتقط ة بالمجهر التقليدي )إلى اليسار( وأخرى بمجهر STED )إلى اليمين( ويمكننا من خالل هذه المقارنة رؤية مدى تحس ن الصورة عند استخدام تقنية.STED 8. صورة STED بلونين لورم دماغي خبيث حيث أن المنطقة الضبابية على اليسار لم تخضع لتصحيح للدقة. 12

14 9 الوحيد الفصل الثاني: مطيافية المف لو ر الجزيء بشكل منفص ل عن ستيفان هيل تقني ة أساس مورنر وويليام بيتزيغ إيريك من ك ل طرح أخرى تسمى بمطيافية الجزيء الم ف لو ر الوحيد Single Fluorophore Microscopy وذلك عن طريق إظهار أنه يمكن الكشف عن الضوء الصادر من جزيئ ة الفرضية بإدخال العينة كمنطل ق كميا ت ضئيل ة باستخدام أظهروا من من أنه البروتينات الممكن نبض ة ضوئي ة ضعيف ة وبما الحصول الم ف لو ر ة ضمن أ ن على صو ر العينة البروتينات قليل ة عن م ف لو ر ة وحيد ة وبالعمل من هذه دق ة ذات طريق عن وبعيدة عالي ة إثارة ل قط ة و ارء لقطة البروتينات ضمن بعضها ضمن العينة سوف تتوهج البروتينات عندما تكون األبعاد فيما بينها أكبر من 222 نانومتر- وهي حدود االنع ارج في المطيافية الضوئية وعندما تحترق الجزيئات البروتينية الم ف لو رة سوف تعيد عملية اإلثارة مرة بعد مر ة مما يؤدي ألخذ الكثير من لقطات البروتينات المنتشرة ضمن العينة فتؤدي هذه الصور لبناء صور ة بدق ة عالي ة للعينة مرة أخرى صورة استطاعت التحايل على القيود المفروضة للمجاهر الضوئية بسبب األطوال الموجية. )ويوض ح 9 مبدأ إجهارية الجزيء الم ف لو ر الوحيد( وبالنسبة لألصبغة المستخدمة في هذه التقنية فهي تشبه إلى حد ما األصبغة المستخدمة في تقنية اإلصدار المحثوث المستنفذ STED حيث يجب أن تكون ذات زمن تأل ق مناسب ومتوافق ة مع البيئة المدروسة )العضية الحية مثال (. وتعتبر كال التقنيتين )اإلصدار المحثوث المستنفذ ومطيافية الجزيء الم ف لو ر الوحيد( بنفس توصلت إليه لجنة الكيمياء لجائزة نوبل في األكاديمية الفعالية تقريبا وهذا ما للعلوم. الملكية السويدية 13 9 THE NOBEL PRIZE IN CHEMISTRY 2014, THE ROYAL SWEDISH ACADEMY OF SCIENCES, Advanced Science Background, 2014.

15 3( 9. تنش ط نبضة من ضوء ضعيف جزءا من مجمل البروتينات المتأل قة حيث تكون المسافة بين بروتينات الجزء المنش ط أكبر من 2.2 ميكرومتر )حد إبه لالنع ارج( فتتأل ق هذه البروتينات ثم تخمد وتعاد العملية على مجموعة أخرى من البروتينات تتسلط عليها النبضة الضوئية 2( ثم تعالج الصور المتتالية للعينة وتدمج األج ازء الواضحة من كل صورة 1( وفي النهاية نحصل على صورة واحدة عالية الدقة تظهر فيها األج ازء الواضحة من كل صورة فردية. 32. تظهر الصورة الوسطى أغشية الليزوزوم lysosome وهي واحدة من أولى الصور الملتقطة من قبل بيتزيك باستخدام مجهر الجزيء الوحيد والى اليسار نفس الصورة مأخوذة بمجهر تقليدي أما إلى اليمين فقد تم تكبير صورة األغشية. 14

16 خاتمة: لم تكن للمجهر الضوئي القدرة على إعطاء دق ة أفضل من نصف طول موجة الضوء المستخدم أما اآلن وبعد هذا االكتشاف فقد أصبح بإمكاننا ليس فقط خرق هذه الحدود بل وتجاوزها إلى أية دقة طورها الحائزون على نوبل لعام نرغب بها وذلك باستخدام الطريقة التي من ندرسها ك نا التي تلك من بكثي ر أصغر أشياء د ارسة اآلن بإمكاننا أصبح أنه يعني هذا تقني ة كونه من المجهر نقل في ساهم قد بدوره وهذا قبل ليغدو بيولوجي ة كيميائي ة. تقني ة بإمكاننا تحدث فالكيمياء د ارسة وليس االحتماالت كانت ك ل فقط تركز جزي ء االكتفاء على على واألفكار الجديدة في د ارسة حدة بمشاهدة كل عد د كما نتائج كبي ر أصبح هذه الجزيئات من باإلمكان التفاعالت أيضا في وذلك وق ت د ارسة من الكيمياء والكيمياء الحيوية. يفتح واح د التفاعالت أبوابا ولكن ال اآلن الكيميائية نهاية أصبح لها وهي من فاإلجهارية التألقية تتضمن تقنيتين رئيسيتين هما اإلصدار المحثوث المستنفذ STED ومطيافية الجزيء الم ف لو ر المدروسة. ذلك من المرء الوحيد SFM الل تان تعتمدان بشكل أساسي على تأل ق جزيئات المواد في العينة "الفائزون لعام 2234 بجوائز نوبل ساهموا في كسر حواجز ك نا نظ نها ال ت خترق وحتى يتمكن صحيحة واذا يتوجب في ق أر ت أن عليه سيرهم اليأس من إمكانية تحقيق رؤيتهم يكون الذاتية ا مثابر ستجد ودعمها بالنظريات العلمية حتى تم كنوا من ويمتلك تنقلوا أنهم القدرة كثي ار على و التحمل كثي ار تعبوا ويؤمن كانوا و بشدة على آ ارءه بأن مشارف ولك نهم صبروا وعادوا إلى متابعة أفكارهم الالمعة والعمل عليها 10 النجاح." من مقابلة البروفيسور سفين ليدين رئيس لجنة نوبل للكيمياء مع الصحفية جوانا روز عن جائزة نوبل للكيمياء للعام

17 قائمة المصادر والمراجع المصادر اإلنكليزية: 1. Johnson, Iain, Spence, Michelle, Molecular Probes Handbook, A Guide to Fluorescent Probes and Labeling Technologies, 11th Edition, Hell, Stefan, stimulated-emission-depletion fluorescence microscopy, OPTICS LETTERS, Vol. 19, No. 11, June 1, The Royal Swedish Academy of Sciences, The Nobel prize in chemistry 2014, Popular Science Background, The Royal Swedish Academy of Sciences, The Nobel prize in chemistry 2014, Science Background, October 8 th الم ارجع اإلنكليزية: 1. An article entitled Fluorescence September 10 th 2014 (5:30 pm) 2. An article entitled STED microscopy September 12 th 2014 (1:30 pm) 3. An article entitled Super-resolution microscopy November 4 th 2014 (3:00 pm) 4. An article entitled super resolution light microscopy wins chemistry Nobel 16

18 November 6 th 2014 (6:00 pm) الم ارجع العربية: موقع "الباحثون السوريون"-مقال بعنوان "جائزة نوبل 2234 للكيمياء.. تقنية مجهرية متقدمة تقربنا أكثر من فهم العمليات الحيوية" بتاريخ 8 تشرين األول/أكتوبر 2234 الساعة 2:00 PM موقع "الكيمياء العربي"-مقال بعنوان " ما الدقة " بتاريخ عالي الم ف لو ر المجهر هو.2 تشرين 2234 الساعة 7:00 PM األول/أكتوبر %D8%A7%D9%84%D9%85%D8%AC%D9%87%D8%B1- %D8%A7%D9%84%D9%85%D9%81%D9%84%D9%88%D8%B1- %D8%B9%D8%A7%D9%84%D9%8A- %D8%A7%D9%84%D8%AF%D9%82%D8%A9%D8%9F/ 17

19 رقم الشكل فهرس األشكال الشرح فل ازت متأل قة تصدر ضوءا مرئيا عند تعريضها لألشعة فوق البنفسجية أسماك بحرية يمكنها أن تتأل ق مصباح الفلورسنت أبعاد األجسام وحدود االنع ارج مقارنة بين آلية عمل المجهر الضوئي التقليدي ومجهر الSTED واحدة من الصور األولى الملتقطة من قبل ستيفان هيل باستخدام مجهر STED مقارنة بين صور ة لبروتين ملتقط ة بالمجهر التقليدي وأخرى بمجهر STED صورة STED بلونين لورم دماغي خبيث مبدأ إجهارية الجزيء الم ف لو ر الوحيد صورة ألغشية الليزوزوم lysosome ملتقطة باستخدام مجهر الجزيء الوحيد رقم الصفحة فهرس الجداول رقم الجدول الشرح رقم الصفحة 11 األصبغة أحدث المستخدمة في تقنية المستنفذ اإلصدار المحثوث.1 18